خرید و دانلود تحقیق آزمایشات کیفی پروتئین ها

خرید و دانلود تحقیق آزمایشات کیفی پروتئین ها

خرید و دانلود تحقیق آزمایشات کیفی پروتئین ها

آزمایشات کیفی پروتئین ها

آزمایش بیوره

ترکیباتی که دارای حداقل دو اتصال یا پیوند پپتیدی می باشند با یون مس در محیط قلیایی کمپلکس بنفش رنگی تولید می کنند.نام این آزمایش از نام ترکیب بیوره که با یون مس کمپلکس می دهد گرفته شده است. در این آزمایش کمپلکس کئوردینانس بین یون مس و چهار نیتروژن (دو نیتروژن از هر پلی پپتید) ایجاد می شود و دارای رنگ بنفش است.

روش کار

به یک میلی لیتر محلول پروتئین سه میلی لیتر بیوره اضافه نمایید و خوب مخلوط کنید بعد از چند دقیقه به لوله آزمایش نگاه کنید و مشاهدات خود را یادداشت نمایید.این آزمایش را برای چند اسیدآمینه نیز انجام دهید.

دناتوره شدن پروتئین ها

تغییر ماهیت یا تغییر در حالت طبیعی در ساختمان پروتئین دناتوره شدن نامیده می شود.این دگرگونی به خصوص در ساختمان دومین سومین و چهارمین پروتئین رخ می دهد.دناتوره شدن ممکن است قابل بازگشت و یا غیر قابل برگشت باشد.عوامل دناتوره کننده را به دو دسته تقسیم می کنند:

۱٫عوامل شیمیایی مانند اسید ها و بازها ،یون فلزات سنگین،پاک کننده ها و اوره

۲٫عوامل فیزیکی مانند حرارت،نور ماورا بنفش و اشعه ایکس

اگر پروتئین دارای فعالی بیولوپیکی قابل سنجش باشد(مانند آنزیم ها) در این صورت میزان دناتوره شدن را می توان اندازه گرفت.زیرا پروتئین آنزیم در اثر تغییر ماهیت ،فعالیت بیولوژیک خود را از دست می دهد.اگر فعالیت حیاتی پروتئین به آسانی قابل اندازه گیری نباشد برای پی بردن به این که آیا دناتوره شدن پروتئین قابل برگشت است یا نه از عوامل دیگری مانند تغییر حلالیت پروتئین در حلال قبلی خود می توان استفاده نمود.چنانچه پروتئین به صورت غیر قابل بازگشت دناتوره شده و رسوب کرده باشد رسوب حاصل در حلال قبلی به خوبی حل نمی شود.

عواملی مانند حرارت ،یون فلزات سنگین یا بعضی اسیدهای آلی قوی پروتئین را به صورت غیر قابل بازگشت دناتوره نموده و همزمان پروتئین را از محیط خارج می نمایند که به آنها عوامل دپروتئینه کننده می گویند.

الف-دناتوره شدن به وسیله حرارت

گرمای بالاتر از ۵۰ درجه سانتی گراد پروتئین را دناتوره می نماید.در نتیجه پروتئین ماهیت طبیعی خود را از دست داده رسوب می نماید.

روش کار:

دو میلی لیتر محلول آلبومین تخم مرغ (۲ درصد) را در یک لوله آزمایش بریزید و در حمام آب جوش قرار دهید.زمان لازم برای دناتوره شدن پروتئین قابل برگشت است یا نه آزمایش زیر را انجام دهید.

بیست میلی لیتر آب مقطر به لوله آزمایش محتوی پروتئین اضافه نمایید و دقت کنید که آیا رسوب پروتئین باقی می ماند و یا این که در آب حل می شود.در صورتی که رسوب پروتئین در آب حل نشود پروتئین به صورت غیر قابل برگشت دناتوره شده است.نتیجه را با لوله کنترل (دارای دو میلی لیتر محلول آلبومین و ۲۰ میلی لیتر آب مقطر)بدون حرارت مقایسه کنید.

ب-راسب شده پروتئین به وسیله یون فلزات سنگین

پروتئین ها با یون فلزات سنگین ترکیب می شوند و نمک های نا محلول تولید می نمایند.از این خاصیت برای خارج کردن پروتئین ها از محلول استفاده می شود بر همین اساس شیر یا سفیده تخم مرغ به بیماری که با فلزی یون جیوه مسموم شده باشد خورانده می شود.کازئین شیر در معده بیمار با جیوه ترکیب شده رسوب می نماید.

Hg Cl2→۲Cl̄ + Hg++

Hg++ + protein → protein-Hg++ ↓

روش کار

سه میلی لیتر محلول پروتئین (مثلا ۲ درصد آلبومین تخم مرغ) را در یک لوله آزمایش بریزید و به آن یک میلی لیتر محلول کلرید جیوه ۰/۵ مولار و یا کلرید باریم اضافه نمایید . مشاهدات خود را یادداشت کنید و با افزودن آب امتحان کنید که آیا دناتوره شدن قابل برگشت است یا نه؟

ج-راسب شدن پروتئین به وسیله اسیدها

پروتئین ها پلی الکترولیت های آمفوتر می باشند.بنابراین تغییرات PH بر اتصال نمکی آنها که موجب استحکام ساختمان سومین آنها می شود اثر می گذارد.بعضی از اسیدها مثلا اسید تری کلرواستیک،اسید تنگستیک و اسیدسولفالسیلیک با غلظت متوسط موجب دناتوره شدن و رسوب پروتئین می شوند.از این رو برای خارج کردن پروتئینها از مایعات بیولوژیکی می توان این اسید ها را به کار برد.مثلا پروتئین ها به وسیله این اسیدها رسوب داده می شوند و مایعات فاقد پروتئین تهیه می گردد.

خرید و دانلود تحقیق آزمایشات کیفی پروتئین ها

برای خواندن ادامه مطلب پروژه تحقیق آزمایشات کیفی پروتئین ها، خرید و دانلود را انجام دهید. تا فایل ورد آن در اختیار شما قرار بگیرد.