خرید و دانلود تحقیق ترانسفرم

خرید و دانلود تحقیق ترانسفرم

خرید و دانلود تحقیق ترانسفرم

چکیده

ترانسفورم سازی مولکولی سلولهای باکتری، نقشی محوری را در روشهای کلون سازی مولکولی ایفا میکند در حال حاضر عمل ترانسفورم سازی به روش شیمیایی و یا به روش شوک الکتریکی (الکتروپوریشن) انجام میشود درصد موفقیت این روشها به میزان تجربه دقت آزمایش کننده ارتباط دارد. بنابراین هر اندازه روش ترانسفورم سازی مولکولی کارایی و کیفیت بیش تری داشته باشد درصد میزان موفقیت آن روش افزایش خواهد یافت، هدف از تحقیق حاضر طراحی یک روش ساده و سریع برای ترانسفورم سازی مولکولی سلولهای E.coli بود تا ضمن عدم نیاز به ابزارهای گران قیمت و اختصاصی واحد کارایی لازم نیز باشد[1].

مواد و روشها:

 در روش ابدایی ما بعد از آماده سازی رسوب سلول باکتریایی، آن را با محلول جدیدی به نام ترانسفورم کننده سلولهای مستعد (CTS) (Competent Transformation Solution) مخلوط پس از اضافه كردن ۱ ميكروليتر DNA پلاسمیدی و انکوباسیون در دمای ۴ درجه سانتی گراد به مدت ۳۰-۵ دقیقه به آن گلوکز اضافه شده و در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد انکوبه گردید، سپس عمل کشت سلولها در پلیت انتخابی LB آگار حاوی ۱۰۰ میلی مولار کلسیم کلراید انجام شد تا پس از انکوباسیون ۱۸ ساعته کلنیهای مربوط به سلولهای ترانسفورم شده بر روی پلیت رشد یابند.

نتایج:

 در این روش مرحله شوک گرمایی حذف شد ضمن این که کارایی آن بیشتر از انواع روشهای معمول محاسبه گردید (۱۰) سلول ترانسفورم شده در هر میکروگرم DNA پلاسمیدی). نتیجه گیری: روش حاضر به عنوان یک روش ساده و راحت برای تهیه همزمان سلولهای مستعد و ترانسفورم سازی معرفی میگردد.

واژه هاي كليدي : ترانسفورم ،سازی سلولهای مستعد، اشریشیاکلی

مقدمه[2]

انتقال پلاسمید (Plasmid) به سلولهای مستعد باکتریایی ((Bacterial Competent cell با استفاده از روش شوک گرمایی روش بنیادین در زیست شناسی مولکولی است. پایه و اساس اکثر روشهای ترانسفورم سازی باکتری ها بر پایه مشاهدات مندل (Mandel) و هیگا (Higa) در سال ۱۹۷۰ طراحی شده است، یک روش ترانسفورماسیون دیگر هم توسط ریو (Ryu) و هارتین (Hartin) ارائه شده است که از شوک الکتریکی (Electroporation) استفاده می کند، کارایی بالای ترانسفورماسیون در این روش بیش از در هـر میکروگرم DNA است. با این وجود، به دلیل نیازمندی روش شوک الکتریکی به ابزارهای اختصاصی و عدم فراهم بودن این ابزارها در بسیاری از آزمایشگاه ها، منطقی است از روشهای ساده تر، کم هزینه تر و با کارایی بالا استفاده شود در روشهای مولکولی بهره گیری از نوعی روش آزمایشگاهی و ارزان سریع و قیمت می تواند جایگزینی مناسب برای روشهای پرهزینه باشد. محققین استفاده از روشهای ارزان قیمت و سريع الوصول را همواره بر روشهای وقت گیر ترجیح دهند. می برای این مقصود جهت ساده سازی روش ترانسفورم ،سازی مطالعات مختلفی صورت گرفته است.

خرید و دانلود تحقیق ترانسفرم

برای خواندن ادامه مطلب پروژه تحقیق ترانسفرم، خرید و دانلود را انجام دهید. تا فایل ورد آن در اختیار شما قرار بگیرد.